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免費代測ELISA試劑盒主要采用的實(shí)驗方法

一、直接法

將抗原直接固定在固相載體上,參加酶符號的一級抗體,即可測定抗原總量,此一級抗體的特異性非常重要。

1. 優(yōu)勢:操作手續簡(jiǎn)略,因無(wú)須運用二抗可防止交互反響。

2. 缺陷:實(shí)驗中的一抗都得用酶符號,但不是每種抗體都適合做符號,費用相對進(jìn)步。


二、間接法

此測定辦法與直接法相似,不一樣在于一級抗體沒(méi)有酶符號,改用酶符號的二級抗體去辨識一級抗體來(lái)測定抗原量。

1. 優(yōu)勢:二抗能夠加強信號,并且有多種挑選能做不一樣的測定剖析。不加酶符號的一級抗體則能保存它zui多的免疫反響性。

2. 缺陷:交互反響發(fā)作的機率較高。


三、雙抗體夾心法

被檢測的抗原包被在兩個(gè)抗體之間,其間一個(gè)抗體將抗原固定于固相載體上,即捕捉抗體。另一個(gè)則是檢測抗體,此抗體可用酶符號后直接測定抗原的量;或不符號,再透過(guò)酶符的二級抗體來(lái)測定抗原的量。這兩種抗體有必要當心選擇,才可防止交互反響或競爭一樣的抗原部位。

1. 優(yōu)勢:高活絡(luò )、高專(zhuān)一性,抗原無(wú)須事前純化。

2. 缺陷:抗原必定得具有兩個(gè)以上的抗體部位。


四、競爭法

樣本里的抗原(自在抗原)和純化并固定在固相載體上的抗原(固定抗原)一同競爭一樣的抗體,當樣品里的自在抗原越多,就能夠越多的抗體,而固定抗原就只能到較少的抗體,反之亦然。經(jīng)清潔過(guò)程,洗去自在抗原和抗體的復合物,只留下固定抗原和抗體的復合物,拿來(lái)與只要固定抗原的對照組成果相比擬,依據呈色區別就可計算出樣品里的抗原含量。

1. 優(yōu)勢:可適用比擬不純的樣本,并且數據再現性很高。

2. 缺陷:全體的敏感性和專(zhuān)一性都較差。


五、根據細胞法(zui新ELISA技術(shù))

是一種新的定性蛋白檢測技術(shù),將細胞直接在微孔板里培育,待檢測時(shí),不需抽提蛋白和裂解細胞,便可直接丈量微孔板里蛋白經(jīng)影響或抑制作用后的改變。

1. 優(yōu)勢:無(wú)需裂解細胞,所以方針蛋白丟失zui少,可測定完好細胞、黏附細胞、還有非粘附細胞。

2. 缺陷:不能測定抗原量。